催化的动力学特性趋化性磷酸酶大驾光临。由磷酸化崔氏衬底调制的活动。
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银匠,莱文博士先令E Bourret RB
催化的动力学特性趋化性磷酸酶大驾光临。由磷酸化崔氏衬底调制的活动。
生物化学杂志。2008年1月11日,283 (2):756 - 65。Epub 2007年11月12日。
- PubMed ID
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17998207 (在PubMed]
- 文摘
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在催化反应调节器崔氏的去磷酸化调节趋化作用的双组分监管体系在大肠杆菌。在为有两个活跃的站点去磷酸化。来洞察细胞机制的精确调控细胞内磷酸化崔氏(CheYp)水平,我们评估了大驾光临的动力学特性。CheZ-mediated去磷酸化的稳态速率CheYp显示标记sigmoidicity CheYp浓度和k (cat) 4.9 (1)。相比之下,获得的功能变异CheZ-I21T远离活性部位的氨基酸替换了双曲动力学并要求低得多CheYp half-saturation但也有类似的k (cat)值作为野生型酶。停止流荧光测量表明,留学生更快在/ CheYp CheZ-I21T协会率(k(协会)= 3.4 x 10 M(7)(1)(1))相对于野生型在(k(协会)= 5.6 x 10(6)米(1)(1))。离解的CheZ.CheYBeF(3)复杂缓慢的野生型在(k (dissoc) = 0.040(1))和CheZ-I21T (k (dissoc) = 0.023(1)),用k(协会)值时,隐含的k (d)值7.1和0.68 nm,分别。然而,比较值k (dissoc)和k (cat)暗示在CheYp并不是在催化和约束力的平衡,一旦CheYp绑定,它几乎总是脱去磷酸。速率常数是整理制定CheZ-mediated去磷酸化的动力学模型,包括由CheYp自动调整,允许在预测活动在和CheYp浓度可能存在于细胞。