定向诱变F1F0 b亚基的ATP合酶在大肠杆菌:通过gln glu - 77 - 85。
文章的细节
-
引用
复制到剪贴板 -
麦考密克KA,凯恩BD
定向诱变F1F0 b亚基的ATP合酶在大肠杆菌:通过gln glu - 77 - 85。
J Bacteriol。1991年11月,173 (22):7240 - 8。
- PubMed ID
-
1682301 (在PubMed]
- 文摘
-
b亚基的大肠杆菌F1F0 ATP合酶含有大量亲水区域被认为是参与F1和F0之间的交互。Oligonucleotide-directed诱变是用来评估该地区的功能段的重要性通过gln glu - 77 - 85。诱变过程采用phagemid DNA模板和掺杂寡核苷酸引物设计来生成一个预先确定的错义突变在目标部分的集合。六十一突变phagemids被识别和显示含有核苷酸替换编码37小说错义突变。突变是孤立的单独或组合4每phagemid重组突变。F1F0 ATP合酶函数研究了突变phagemid互补的一种新颖的大肠杆菌菌株uncF (b)基因被删除。琥珀酸固体互补是评估通过观察增长基本培养基。许多phagemid-encoded uncF在目标领域(b)基因突变导致生长表型表达的菌株原生所用b亚基,建议丰富F1F0 ATP合酶的活动。相比之下,一些特定的突变与酶功能的丧失。ala - 79 - - - - - Pro Phagemids指定参数- 82 - - - - - Pro, arg - 83 - - - - - Pro,或gln - 85 - - - - - Pro突变未能补uncF (b) gene-deficient大肠杆菌。 F1F0 ATP synthase displayed the greatest sensitivity to mutations altering a single site in the target segment, Ala-79. The evidence suggests that Ala-79 occupies a restricted position in the enzyme complex.