灭活大肠杆菌的外膜磷脂酶的亲和标签hexadecanesulfonyl氟化物。一个活性部位丝氨酸的证据。
文章的细节
-
引用
复制到剪贴板 -
Horrevoets AJ, Verheij嗯,德哈斯GH
灭活大肠杆菌的外膜磷脂酶的亲和标签hexadecanesulfonyl氟化物。一个活性部位丝氨酸的证据。
欧元。1991 5月23日,198 (1):247 - 53。
- PubMed ID
-
2040286 (在PubMed]
- 文摘
-
大肠杆菌的外膜磷脂酶(OM PLA)是一种膜结合酰基水解酶具有广泛的底物特异性。为了获得更多的洞察这种酶的作用机制,我们设计了一个active-site-directed抑制剂OM解放军已知的底物特异性的基础上作为第一步的说明这种酶的催化机理。抑制剂,hexadecanesulfonyl氟化物,由一个长烃链的高亲和性结合酶和磺酰氟基活性基团。OM解放军的失活的动力学hexadecanesulfonyl氟化物进行了研究在特里同x - 100胶束。失活是非常快的,具体的和显示了相同的特征对酰基特异性,pH值剖面和金属离子的活动要求OM解放军在基板上。孵化的OM解放军化学计量的hexadecanesulfonyl氟化物导致酶活性和不可逆转的损失,造成Ser144 sulfonylation。这Ser144,我们建议的活性部位丝氨酸OM解放军,是HDSNG序列的一部分,而在水溶性丝氨酸蛋白酶和脂肪酶的结构主题GXSXG通常遇到的。失活的动力学的基础上,OM解放军hexadecanesulfonyl氟化物,我们将讨论可能的酶的催化机理。