和细胞动力学限制数量的吡哆醇(维生素b6) 5 '磷酸氧化酶的大肠杆菌k - 12。
文章的细节
-
引用
复制到剪贴板 -
赵G,温克勒我
和细胞动力学限制数量的吡哆醇(维生素b6) 5 '磷酸氧化酶的大肠杆菌k - 12。
J Bacteriol。1995年2月,177 (4):883 - 91。
- PubMed ID
-
7860596 (在PubMed]
- 文摘
-
我们报告的净化和enzymological表征大肠杆菌k - 12吡哆醇(维生素b6) 5 '磷酸氧化酶(PNP / PMP),这是一个关键承诺酶生物合成的重要辅酶维生素b6 5 '磷酸(PLP)。由pdxH编码的酶过表达和纯化电泳同质性柱层析法的四个步骤。纯化PdxH酶是一种耐热51-kDa为包含一个分子黄素单核苷酸(FMN)。在分子氧的存在,PdxH酶使用PNP型或PMP作为衬底(105公里= 2,microM kcat = 0.76和1.72 s - 1 PNP型和PMP)并产生过氧化氢。因此,在有氧条件下,PdxH酶作为古典单功能的黄素蛋白氧化酶kcat转化率极低。kcat / Km值的比较表明,PNP型而不是PMP是大肠杆菌的体内基质PdxH氧化酶。相比之下,真核酶也有类似的kcat PNP型和PMP / Km值似乎作为清道夫。大肠杆菌PNP / PMP氧化酶活动是竞争性抑制通路最终产品,PLP,模拟,4-deoxy-PNP, Ki值分别为8和105 microM。Immunoinhibition研究表明,酶的催化域可能由不连续残留的多肽序列。两个独立的定量方法表明,PNP / PMP氧化酶存在于约700年到1200年二聚体酶分子在大肠杆菌细胞呈指数级增长的基本培养基加葡萄糖在37度c。因此,大肠杆菌beplayappPNP / PMP氧化酶是一个相对丰富,但催化地缓慢,酶致力于PLP辅酶生物合成。