活性部位的结构和定向性大肠杆菌pyridoxine-5磷酸氧化酶。
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迪齐射ML, Ko TP, Musayev FN, Raboni年代,Schirch V, Safo可
活性部位的结构和定向性大肠杆菌pyridoxine-5磷酸氧化酶。
J杂志。2002年1月18日,315 (3):385 - 97。
- PubMed ID
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11786019 (在PubMed]
- 文摘
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Pyridoxine-5的磷酸氧化酶催化氧化的C4的醇基或氨基的两个基板吡哆醇5 '磷酸吡哆胺5 '磷酸醛,形成5 '磷酸吡哆醛。氢原子从C4的电子在氧化和一对紧密地绑定FMN转移。新晶体形式的5 '磷酸吡哆醛的酶在复杂表明,蛋白质的氨基端部分折叠在活性部位隔离溶剂的配体在催化循环。使用(4或)- [(3)H] PMP作为衬底,近100%的radiolabel出现在水氧化后5 '磷酸吡哆醛。因此,这种酶是特定切除proR氢原子的前手性的C4的吡哆胺碳原子5 '磷酸。网站所有残留的突变体是由活性部位,与氧原子或胺组交互C4的基质。其它残留物,使与磷酸盐基质的一部分变异的交互。突变体表现出亲和力下降,但表现出相当大的催化活性,表明这些残留物是重要的约束力,但在催化扮演一个小角色。的例外是Arg197绑定和催化的重要。R197 M突变酶催化的优点氢原子(4或)- [(3)H] PMP,显示胍盐侧链中扮演一个重要的角色在决定定向性。 The crystal structure and the stereospecificity studies suggests that the pair of electrons on C4' of the substrate are transferred to FMN as a hydride ion.