完整的氨基酸序列和鉴定大肠杆菌的活性部位精氨酸肽2-keto-4-hydroxyglutarate醛缩酶。
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多辆CJ,德克EE
完整的氨基酸序列和鉴定大肠杆菌的活性部位精氨酸肽2-keto-4-hydroxyglutarate醛缩酶。
J生物化学杂志。1988年8月25日,263 (24):11683 - 91。
- PubMed ID
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3136164 (在PubMed]
- 文摘
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完整的氨基酸序列的2-keto-4-hydroxyglutarate醛缩酶的大肠杆菌以以下的方式建立了。与二硫苏糖醇在减少,净化醛缩酶与碘乙酰胺烷基化,随后用胰蛋白酶消化。结果19肽峰观察通过高效液相色谱法,这比起21预期胰蛋白酶的劈理产品,都是孤立的,纯化,分别排序。重叠结合测序获得的抗菌肽的氨基端区域完整的醛缩酶和裂开的完整的酶与溴化氰subdigestion紧随其后的三大溴化氰肽与金黄色葡萄球菌V8 endoproteinase, endoproteinase赖氨酸C,或胰蛋白酶citraconylation赖氨酸残留物。分子的一级结构决定如下。(公式;看到文本)2-Keto-4-hydroxyglutarate醛缩酶的大肠杆菌由213个氨基酸单元和三聚物的分子量22286年和66858年,分别。三个子单元中没有观察到的微观不均一性。包含活性位点的肽精氨酸残基(多辆,c·J。Ghalambor, m。,德克·e·e .(1985)生物。 Chem. 260, 5480-5485) was also isolated and sequenced; this arginine residue occupies position 49. The Schiff base-forming lysine residue (Vlahos, C. J., and Dekker, E. E. (1986) J. Biol. Chem. 261, 11049-11055) is located at position 133. Whereas the active-site lysine peptide of this aldolase shows 65% homology with the same peptide of 2-keto-3-deoxy-6-phosphogluconate aldolase from Pseudomonas putida, these two proteins in toto show 49% homology.