针对antipeptide抗体细胞色素P450 2 c18基于抑制单克隆抗体的抗原决定基映射P450 2 c51。

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理查森,格里芬KJ,荣格F, Raucy杰,约翰逊EF

针对antipeptide抗体细胞色素P450 2 c18基于抑制单克隆抗体的抗原决定基映射P450 2 c51。

拱生物化学Biophys。1997年2月15日,338 (2):157 - 64。doi: 10.1006 / abbi.1996.9817。

PubMed ID

9028867 (在PubMed

]

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指定的抑制性单克隆抗体识别的抗原决定基2 f5,提高对P450 2 c5,被映射到氨基酸237 - 260使用重组抗原和免疫印迹嵌合和部分融合蛋白由兔子P450 2 c2, 2 c4、c5,和2 c16,被2 f5,和从c1和2 c3。当抗原决定基的序列2 f5氨基酸(237 - 260)是与其他兔子2 c p450相比,一个赖氨酸残基位置253似乎是可能的行列式2 f5免疫反应性。替换赖氨酸P450 2中谷氨酸253 c3 (2 c3e253k)免疫反应性和2 f5抑制孕酮代谢的能力由P450 2 c3e253k催化。序列比对发现,这种抗原决定基位于靠近的抗原决定基确定LKM-1自身抗体P450 2 d6。基于这些结果,一个antipeptide抗体长大到相应的区域氨基酸(252 - 263)的人类使用c18 P450 2。结果antipeptide抗血清识别P450 2 c18但不是P450 2 c8, 2 c9,或者2 c19。然而,antipeptide c18抗血清没有抑制2 c18-catalyzed安定去。人类2 c p450也通过免疫印迹分析量化一组六使用大肠杆菌表达人类肝脏微粒体p450的标准。免疫印迹分析表明,如果存在,P450 2 c18表达在非常低的水平(< 2.5 pmol /毫克),而P450 2 c8, 2 c9,和2 c19很容易检测到。

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