谷氨酸gamma-monohydroxamate和羟胺替代基质大肠杆菌天冬酰胺合成酶B。
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引用
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Boehlein SK,舒斯特尔SM,理查兹NG
谷氨酸gamma-monohydroxamate和羟胺替代基质大肠杆菌天冬酰胺合成酶B。
生物化学。1996年3月5日,35 (9):3031 - 7。doi: 10.1021 / bi952505l。
- PubMed ID
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8608142 (在PubMed]
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大肠杆菌天冬酰胺合成酶B (as - B气体分离器)催化合成天冬酰胺的天冬氨酸和谷氨酰胺ATP-dependent反应。这种酶的能力采用羟胺和L-glutamic酸gamma-monohydroxamate (LGH)作为替代基质代替氨、谷酰胺分别被调查。酶能够函数作为氨基水解酶,解放从LGH羟胺催化效率高,以k(猫)/ k (M)。此外,as - b气体分离器中羟胺合成酶的动力学参数确定活动非常类似的氨气。氮从LGH生成天冬氨酸beta-monohydroxamate也是催化,as - b气体分离器。尽管这样的观察了几个成员trpG amidotransferase家庭,我们的结果似乎是第一个证明氮从谷氨酰胺转移可能发生类似物在purF amidotransferase。然而,k(猫)/ k (M)从LGH ATP-dependent转让羟胺为天冬氨酸减少三倍相对于glutamine-dependent天冬酰胺的合成。此外,as - b气体分离器突变天冬酰胺取代的丙氨酸(N74A)也可以使用羟胺作为替代基质LGH氨和催化水解。催化效率(k (cat) / k (M))的氮转移LGH、谷酰胺、beta-aspartyl-AMP N74A as - b气体分离器突变体几乎是相同的。这些观察结果支持这个提议,asn - 74在催化glutamine-dependent氮转移过程中发挥作用。 We interpret our kinetic data as further evidence against ammonia-mediated nitrogen transfer from glutamine in the purF amidotransferase AS-B. These results are consistent with two alternate chemical mechanisms that have been proposed for this reaction [Boehlein, S. K., Richards, N. G. J., Walworth, E. S., & Schuster, S. M. (1994) J. Biol. Chem. 269, 26789-26795].
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