I型前胶原蛋白(COL1A1)中的单碱基突变，在成骨不全症的致命变异中将甘氨酸α 1-541转化为天门冬氨酸:用DNA异质双工碳二亚胺反应检测突变，并对PCR产物进行直接测序。
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庄JP, Constantinou CD, Ganguly A, Prockop DJ
I型前胶原蛋白(COL1A1)中的单碱基突变，在成骨不全症的致命变异中将甘氨酸α 1-541转化为天门冬氨酸:用DNA异质双工碳二亚胺反应检测突变，并对PCR产物进行直接测序。
胡恩杰。1991年6月;48(6):1186-91。
- PubMed ID
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2035536 (PubMed视图］
- 摘要
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一名患有致命成骨不全症的先证患者的皮肤成纤维细胞合成了明显正常的I型前胶原和一种由于翻译后过度修饰而电泳流动性较慢的I型前胶原。用蛋白酶消化法测定胶原蛋白分子的热展开比正常情况下低2℃左右。beplayapp然而，令人惊讶的是，胶原酶A和B片段显示了基本正常的熔化剖面。用碳二亚胺修饰的新技术对cDNA异质双核苷酸进行了分析，结果表明在α 1(I)链的550氨基酸密码子附近发生了突变。beplayapp随后通过PCR和核苷酸测序对cDNA进行扩增，发现COL1A1基因的α 1-541位点上有一个天冬氨酸密码子取代甘氨酸的单碱基突变。这里的结果证实了先前的迹象，即I型前胶原中甘氨酸取代的影响是高度特定的。他们还证明，最近描述的通过碳二亚胺修饰DNA异质双工体检测单碱基差异的技术可以有效地用于定位大基因中的突变。