由抗肿瘤蛋白质组学分析dna蛋白质交联氮芥茉。
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loeb RL、Michaelson-Richie ED Codreanu SG, Liebler,坎贝尔CR, Tretyakova纽约
由抗肿瘤蛋白质组学分析dna蛋白质交联氮芥茉。
化学Res Toxicol。2009年6月22日(6):1151 - 62。doi: 10.1021 / tx900078y。
- PubMed ID
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19480393 (在PubMed]
- 文摘
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氮芥茉是临床抗肿瘤药物用于治疗各种肿瘤的条件。这些化合物的生物活性通常归因于能力诱导dna dna交叉连接。然而,氮芥茉能够产生各种病变,包括dna蛋白质交叉连接(dpc)。dpc引起氮芥茉特征明显不是因为他们的结构复杂性和先前的特异性和灵敏度不足可用实验方法。在目前的工作,亲和捕获方法结合质量spectrometry-based蛋白质组学是用来确认哺乳动物蛋白质与DNA形成共价交叉连接在一个简单的氮芥,氮芥。孵化后5 '生物素化的DNA工器核蛋白质提取,dpc被链霉亲和素珠亲和捕获,孤立和交联蛋白是由高效液相chromatography-electrospray串联质谱的胰蛋白酶的肽。氮芥治疗导致dpc的形成与核蛋白质参与染色质调节、DNA复制和修复,细胞周期控制、转录调控、细胞结构。免疫印迹分析是用来确定蛋白质识别和量化drug-mediated交联的程度。质谱的氨基acid-nucleobase轭合物中总蛋白水解消化透露,mechlorethamine-induced dpc N7立场的形成通过烷基化鸟嘌呤在双螺旋DNA和蛋白质中半胱氨酸硫醇给N - [2 - (S-cysteinyl)乙基)- N - [2 - (guan-7-yl)乙基]甲胺病变。所述结果表明细胞暴露于氮芥茉导致大范围的核蛋白质的交联染色体DNA,可能导致这些药物的细胞毒性和诱变效应。