检测神经元谷氨酸释放的基因编码的表面展示纳米传感器。

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Looger LL Okumoto年代,Micheva KD,雷蒙RJ,史密斯SJ, Frommer世行

检测神经元谷氨酸释放的基因编码的表面展示纳米传感器。

《美国国家科学院刊S a . 2005年6月14日;102 (24):8740 - 5。Epub 2005年6月6日。

PubMed ID

15939876 (在PubMed

]

文摘

谷氨酸是主要的兴奋性神经递质在哺乳动物大脑。一旦发布,快速去除突触间隙是至关重要的预防会和邻近的突触溢出。尽管共识谷氨酸在正常和疾病生理的作用,技术问题限制我们理解完整细胞的新陈代谢。监控谷氨酸水平的内部和表面的活细胞,基因编码的纳米传感器。谷氨酸的荧光蛋白质指标(折叠布)由谷氨酸/天冬氨酸结合蛋白ybeJ从大肠杆菌融合两个绿色荧光蛋白的变异。三个传感器较低亲和力的谷氨酸是由突变的残留peristeric ybeJ绑定的口袋里。在配体的存在,翻转显示浓度降低效率。当表面表达鼠海马神经元或PC12细胞中,传感器响应与一个可逆细胞外谷氨酸浓度减少烦恼效率。神经元的去极化导致减少烦恼效率对应300海里谷氨酸在细胞表面。没有改变在烦恼时观察到的细胞表达传感器细胞溶质的过冷和20毫米谷氨酸,符合最小谷氨酸摄取到胞质谷氨酸水平的贡献。 The results demonstrate that FLIPE sensors can be used for real-time monitoring of glutamate metabolism in living cells, in tissues, or in intact organisms, providing tools for studying metabolism or for drug discovery.

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药物

谷氨酸