转染人MRP2基因的MDCK细胞是人肠粘膜的良好模型吗?

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唐飞，堀江贵文，波夏特RT

转染人MRP2基因的MDCK细胞是人肠粘膜的良好模型吗?

Pharm Res. 2002 Jun;19(6):773-9。

PubMed ID

12134946 (PubMed视图

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摘要

目的:研究转染人MRP2基因(MDCK-MRP2)的Madin-Darby犬肾细胞是否为良好的人肠粘膜模型。方法:采用Western blotting方法比较MRP2在Caco-2细胞中的表达与该外排转运蛋白在mdck -野生型(MDCK-WT)和MDCK-MRP2细胞中的表达。MDCK-MRP2、MDCK-WT中MRP2的极化外排活动。以长春碱为底物，比较转染人MDR1基因(MDCK-MDR1)的MDCK细胞和Caco-2细胞。在GF120918 (2 microM)存在的情况下，测定了Caco-2和MDCK-MRP2细胞中长春碱外排的表观Michaelis-Menten常数(K(M)， Vmax)，该物质抑制p -糖蛋白，但不影响MRP2。已知底物/ MRP2抑制剂的表观抑制常数(K(I))通过测量它们对这些细胞系中长春碱外排的影响来确定。结果:Western blotting检测MDCK-MRP2细胞的MRP2表达水平高于MDCK-WT和Caco-2细胞。在Caco-2和MDCK细胞中表达的两种MRP2亚型在分子量为150 kD和190 kD时迁移。在MDCK-MRP2细胞中，150kd亚型似乎过表达。MDCK-MRP2细胞单层比Caco-2和MDCK-WT细胞单层表现出更高的长春碱极化外排。 K(M) values for vinblastine in Caco-2 and MDCK-MRP2 cells were determined to be 71.8+/-11.6 and 137.3+/-33.6 microM. respectively, and Vmax values were determined to be (0.54+/-0.03 and 2.45+/-0.31 pmolcm(-2)s(-1), respectively. Known substrates/inhibitors of MRP2 showed differences in their ability to inhibit vinblastine efflux in Caco-2 cells as compared to MDCK-MRP2 cells CONCLUSIONS: These data suggest that MDCK-MRP2 cells overexpress only the 150 kD isoform of MRP2. The 190 kD isoform, which was also found in Caco-2 cells and MDCK-WT cells, was present in MDCK-MRP2 cells but not over expressed. The apparent kinetics constants and affinities of some MRP2 substrates were different in Caco-2 cells and MDCK-MRP2 cells. These differences in substrate activity could result from differences in the relative expression levels of the MRP2 isoforms present in Caco-2 cells and MDCK-MRP2 cells and/or differences in the partitioning of substrates in these two cell membrane bilayers.

beplay体育安全吗引用本文的药物库数据

药物转运蛋白

药物	转运体	种类	生物	药理作用	行动
依托泊苷	管状多特异性有机阴离子转运体	蛋白质	人类	未知的	底物 抑制剂	细节
奎尼丁	管状多特异性有机阴离子转运体	蛋白质	人类	未知的	抑制剂	细节
利血平	管状多特异性有机阴离子转运体	蛋白质	人类	未知的	抑制剂	细节
长春花碱	管状多特异性有机阴离子转运体	蛋白质	人类	未知的	底物 抑制剂 诱导物	细节
长春新碱	管状多特异性有机阴离子转运体	蛋白质	人类	未知的	底物 抑制剂	细节

绑定属性

药物	目标	财产	测量	pH值	温度(°C)
环孢霉素	管状多特异性有机阴离子转运体	Ki (nM)	8110	N/A	N/A	细节
依托泊苷	管状多特异性有机阴离子转运体	Ki (nM)	756000	N/A	N/A	细节
利血平	管状多特异性有机阴离子转运体	Ki (nM)	295000	N/A	N/A	细节
长春新碱	管状多特异性有机阴离子转运体	Ki (nM)	802000	N/A	N/A	细节